
网上有很多关于双缩脲反应的知识,也有很多人为大家解答关于双缩脲反应原理的问题,今天小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
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二、双缩脲反应
一、双缩脲试剂使蛋白质显紫色的原理是什么?
缩二脲试验是指具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2反应生成红紫色的复合物。所有蛋白质都有这种颜色反应。缩二脲试剂是指能与具有两个以上肽键的化合物发生红紫色反应的试剂。是NaOH和CuSO4。实验时,在含有蛋白质的溶液中加入等体积的NaOH溶液,混匀后再滴几滴CuSO4溶液(少量),即依次加入NaOH和CuSO4溶液。如果在NaOH中混合几滴CuSO4溶液,然后加入到含有蛋白质的溶液中,混合溶液中就没有Cu2,就不会发生显色反应。除了-CONH-、-CH2-、NH2-、-CS-NH2。
二、双缩脲反应
在碱性溶液(NaOH)中,缩二脲(HNOC-NH-Conh)能与铜离子(Cu)反应生成紫红色的络合物(该物质的分子结构如图所示),此反应称为缩二脲试验。
铜溶液作用时,会形成紫色或蓝紫色的络合物。
注意:除了-CO-NH-、(-conh-)、(-ch-)、(-NH-)、(-CS-CS-NH)等基团也有此反应。
扩展信息:
由于蛋白质分子中含有许多类似缩二脲的肽键,在碱性溶液中也能与铜离子生成缩二脲试验,颜色深浅与蛋白质含量的关系在一定范围内符合比尔定律,与蛋白质的氨基酸组成和分子量无关,所以可以用缩二脲法测定蛋白质的含量(借助分光光度计,可以减少误差)。
双缩脲试验主要涉及肽键,所以受蛋白质特异性影响较小。而且所用试剂廉价易得,操作简便;可检测范围为1-10 mg蛋白质,适用于精度要求不高的蛋白质含量测定,可检测的蛋白质含量必须在0.5mg左右以上,双缩脲法存在准确度低、样本量大的缺点。
干扰这种测定的物质包括性质为氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性显色反应,铜离子也容易被还原,有时会出现红色沉淀。
以上就是关于双缩脲反应的知识,后面我们会继续为大家整理关于双缩脲反应原理的知识,希望能够帮助到大家!










