液相色谱概述液相色谱以经典色谱为基础，引入了气相色谱的理论。技术上，流动相改为高压输送(zui的高压输送压力可达4.9107Pa)。色谱柱以特殊方式填充小粒径填料，使柱效远高于经典液相色谱(每米塔板数可达数万或数十万)；同时在柱后连接一个高灵敏度的检测器，可以连续检测流出液。
一、功能：
1.高压：液相色谱以液体为流动相(称为载液)，液体流经色谱柱，受到的阻力很大。为了快速通过色谱柱，必须对载液施加高压。一般可达150 ~ 350 105 Pa。
2.高速：柱内流动相流速比经典色谱快得多，一般可达1 ~ 10 ml/min。液相色谱的分析时间比经典液相色谱少得多，一般不到1小时。3.最近，许多新的固定相被开发出来，大大提高了分离效率。
4.高灵敏度：高灵敏度检测器已广泛应用于液相色谱，进一步提高了分析的灵敏度。比如荧光检测器的灵敏度可以达到10-11g。此外，样品量少，通常为几微升。
5.适用范围广：气相色谱与液相色谱的比较：气相色谱虽然具有分离能力好、灵敏度高、分析速度快、操作方便等优点，但由于技术条件限制，很难用气相色谱分析沸点过高或热稳定性差的物质。而液相色谱只要求样品可以不经气化制成溶液，所以不受样品挥发性的限制。液相色谱原理上可以用来分离分析沸点高、热稳定性差、相对分子量大(400以上)的有机化合物(这些物质几乎占有机化合物总量的75% ~ 80%)。据统计，在已知的化合物中，能被气相色谱分析的约占20%，能被液相色谱分析的占70 ~ 80%。
二、性质与原理：液相色谱按其固定相的性质可分为凝胶色谱、疏水液相色谱、反相液相色谱、离子交换液相色谱、亲和液相色谱和聚焦液相色谱。不同类型的液相色谱分离或分析各种化合物的原理与相应的普通液相色谱基本相似。不同的是液相色谱法灵敏、快速、分辨率高、重复性好，而且必须在色谱仪中进行。
液相色谱仪的操作和原理随着分析测定需求的日益增加，液相色谱仪具有比经典液相色谱柱装置更智能的操作系统，提高了稳定性、灵敏度和可靠性，应用于食品检测、化学分析、环境监测和药物分析等多个领域。
一、液相色谱仪工作原理简介
能分离和鉴别两种状态的液体混合物的仪器：液态和固态。
注：这种先分离后鉴定的方法适用于液-液色谱(LLC)和液-固色谱(LSC)的混合物。
液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温控系统、色谱柱、检测器和信号记录系统组成。此外，杰克仪器液相色谱仪的配套产品还有六通进样阀、自动进样器、超声波清洗器、色谱柱培养箱、在线脱气器、溶剂过滤器、真空泵、液相色谱柱等。
二、液相色谱仪操作的五个步骤
1、准备
1.1.准备所需的流动相，用合适的0.45滤膜过滤，超声脱气20min。
1.2.根据待测样品的需要，更换合适的色谱柱(注意方向)和定量环。
1.3.准备s
2.3.将管道的不锈钢过滤头放入准备好的流动相储液瓶中。
2.4.逆时针转动泵的排放阀大约半圈，然后松开排放阀。
2.5.按下泵(清洗)键。绿灯亮时，以5.0ml/min的流速开始冲洗，约2分钟。当管道中没有气泡时，按停止键重置流量值。
3、设计参数
3.1.流速设置
3.2.波长设置
3.3.设置完成后，按下运行按钮。
3.4.色谱工作站操作：依次执行操作打开在线工作站通道1 OK 数据采集，然后进行零点校正，检查基线。当基线稳定时，关闭检查基线，可以注入样品。
取样后收集、预览、检查结果并打印。
4、注射
4.1.采样前，将(A/Z)检测器按钮置零，检查基数是否为0mv，如有偏差，按(零点校正)按钮进行调试。
4.2.用样品清洗注射器，去除气泡，抽取适量后，将手动进样阀杆调整到(Load)位置，将样品注入进样阀后，再将样品调整到(inject)位置，完成进样操作步骤，进入在线工作站自动采集数据。
5、系统清洁
因为分析样品时流动相系统含有缓冲盐，所以需要使用10%的甲醇水溶液，以1.0ml/min的速度冲洗40分钟，然后更换甲醇试剂，以同样的1.0ml/min的速度冲洗40分钟，按下(停止)按钮停泵并关机。
三、液相色谱仪的工作原理
首先用高压泵将流动相泵入系统，样品溶液通过进样器进入流动相，被流动相加载到色谱柱(固定相)中。由于样品溶液中各组分在两相中的分配系数不同，在两相中相对运动过程中，经过反复的吸附-解吸分配过程，各组分的移动速度差异较大，被分离成单个组分依次流出柱外。当通过检测器时，样品浓度被转换成电信号并传输到记录仪，数据以图谱的形式打印出来。高效液相色谱仪主要包括进样系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。液相色谱常区分为吸附柱色谱、分配柱色谱、离子交换柱色谱、凝胶柱色谱，以及根据工作原理命名的四种色谱。
