
什么是荧光激发光谱?荧光光谱包括激发光谱和发射光谱。激发光谱是荧光物质在不同波长的激发光作用下所测得的某一波长的荧光强度的变化,即不同波长激发光的相对效率;发射光谱是在固定波长的激发光作用下,不同波长的荧光强度的分布,即荧光中不同波长的光成分的相对强度。
荧光激发光谱:让不同波长的激发光激发荧光物质使其发出荧光,让荧光以固定的发射波长照射检测器。然后,以激发光波长为横坐标,荧光强度为纵坐标绘制的图形称为荧光激发光谱。发射光谱的形状与激发光的波长无关。荧光光谱:保持激发光的波长和强度不变,让荧光物质发出的荧光通过发射单色仪照射到检测器上,即扫描,以荧光波长为横坐标,荧光强度为纵坐标作图,称为荧光光谱,又称荧光发射光谱。
发射光谱是固定激发波的波长,测量发射光的强度与波长(有时是波数或频率等)的关系。).一般来说,发射光谱测量发射光的颜色。激发光谱是固定发射光的波长,测量激发光波长与荧光强度的关系。如果我们从发射光谱中知道一个分子的最大发射波长是500nm,我们想知道用哪个波长的激发光照射这个分子,可以得到最大的发射强度,这可以通过测量激发光谱来实现。通常,最大激发波长小于最大发射波长。在实践中,根据我个人的经验,发射光谱比激发光谱用得多。
激发光谱和荧光发射光谱的形成任何荧光物质都有两个特征光谱,即激发光谱和荧光发射光谱。
1.激发光谱
保持荧光发射波长不变(即固定发射单色仪),依次改变激发光波长(即调节激发单色仪),测量不同波长激发下得到的荧光强度F(即激发光波长扫描)。然后,通过以激发光的波长为横坐标,荧光强度f为纵坐标作图,可以获得荧光物质的激发光谱。激发光谱中最大荧光强度对应的波长为最大激发波长,是激发荧光最敏感的波长。物质的激发光谱和吸收光谱类似,区别在于纵坐标。
2.荧光光谱
荧光光谱,也称为发射光谱。保持激发光波长不变(即固定激发单色仪),依次改变荧光发射波长,测量样品在不同波长下发射的荧光强度F。以发射波长为横坐标,荧光强度f为纵坐标,得到荧光发射光谱。对应于发射光谱中最大荧光强度的波长是最大发射波长。










